免疫生物學(xué)測試

1、混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)

混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)（mixed lymphocyte reaction，MLR）， 又稱混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)，是指兩個(gè)無關(guān)個(gè)體、功能正常的淋巴細(xì)胞在體外混合培養(yǎng)時(shí)，由于細(xì)胞表面HLA-II類抗原D和抗原DP不同，從而可互相刺激對方淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化，釋放淋巴細(xì)胞因子如IL-2等。在抗體藥開發(fā)體外功能實(shí)驗(yàn)方案中，通過檢測MLR實(shí)驗(yàn)中釋放的細(xì)胞因子量來評價(jià)這些抗體分子的活性。

DC-T混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)中，T細(xì)胞活化并釋放細(xì)胞因子IL-2、IFN-Γ

2、T細(xì)胞激活、增殖實(shí)驗(yàn)

T 淋巴細(xì)胞的活化是免疫應(yīng)答的核心，誘導(dǎo) T 細(xì)胞活化、增殖及分化為效應(yīng) T 細(xì)胞需要雙信號刺激。最常見的用于 T 細(xì)胞體外活化的是抗 CD3 抗體 和抗 CD28 抗體，待T細(xì)胞活化后，可以通過FACS，ELISA等方法檢測IL-2、IFN-Γ等來確定T細(xì)胞活化和增值的狀態(tài)。

FACS檢測aCD3/aCD28誘導(dǎo)的小鼠T細(xì)胞的活化、增殖，包括CFSE峰圖的增加及細(xì)胞因子IL-2、IFN-Γ

3、T細(xì)胞殺傷功能實(shí)驗(yàn)

T細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性是細(xì)胞毒性T細(xì)胞（CTL）的特性，凡致敏的T細(xì)胞再次遇相應(yīng)靶細(xì)胞抗原，可表現(xiàn)出對靶細(xì)胞的破壞和溶解作用，它是評價(jià)機(jī)體細(xì)胞免疫水平的一種常用指標(biāo)，臨床上特別是測定腫瘤患者CTL殺傷腫瘤細(xì)胞的能力，常作為判斷預(yù)后和觀察療效的指標(biāo)之一。

待測抗體為CD3/CD19 雙特異性抗體; 效應(yīng)細(xì)胞為純化后的CD3+ T 細(xì)胞；靶細(xì)胞為OCI-LY-19；E:T比為10:1; 共同孵育時(shí)間為4小時(shí)；

4、抗體依賴的細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)ADCC

IgG抗體可介導(dǎo)這些細(xì)胞發(fā)揮ADCC作用，其中NK細(xì)胞是能發(fā)揮ADCC作用的主要細(xì)胞。在抗體介導(dǎo)的ADCC作用的發(fā)生過程中，抗體只能與靶細(xì)胞上的相應(yīng)抗原表位特異性結(jié)合，而NK細(xì)胞等效應(yīng)細(xì)胞可殺傷任何已與抗體結(jié)合的靶細(xì)胞，故抗體與靶細(xì)胞上的抗原結(jié)合是特異性的，NK細(xì)胞等對靶細(xì)胞的殺傷作用是非特異性的。

5、補(bǔ)體依賴的細(xì)胞殺傷實(shí)驗(yàn)CDC

補(bǔ)體依賴的細(xì)胞毒性（complement dependent cytotoxicity;CDC ），是指補(bǔ)體參與的細(xì)胞毒作用，即通過特異性抗體與細(xì)胞膜表面相應(yīng)抗原結(jié)合，形成復(fù)合物而激活補(bǔ)體經(jīng)典途徑，所形成的攻膜復(fù)合物對靶細(xì)胞發(fā)揮裂解效應(yīng)。

6、流式細(xì)胞術(shù)(FACS)